فصل سوم
بررسی منابع
۳- بررسی منابع
۳-۱- مروری بر مطالعات کشت بافت در گیاهان دارویی
تحقیقات انجام گرفته در مورد گیاه A.annua که بومی منطقه معتدله و دارای ماده ضد مالاریا، ضد تب و کشنده انتخابی سلول های سرطان سینه، آرتمیزنین است کارهای زیادی صورت گرفته است (Prasad, S. 1999).
جدول (۲-۱) نشان دهنده تلاشهای صورت گرفته در کشت بافت Artemisia annua می باشد. در یک آزمایش از گیاهچه های رشد یافته بالغ نوک ساقه جدا و بعد از استریل روی محیط MS حاوی ترکیب فاکتوریل از هورمونهای (۰۱ mgl -۱ ۲,۴-D/0 و ۰ و ۱) و (BAPmgl-1 ۱و ۱/. ، ۰) کشت شد و در تمام این تیمارها کالوس دهی وجود داشت. BAP به تنهایی mgl-1 ۱/۰ بیشترین مقدار ساقه دهی را دارد. ولی بیشترین ساقه طبیعی در میزان هورمون mgl-1 ۱ BAP ایجاد شد. میزان آرتمیزنین در ساقه های درون شیشه ای ۳% تا ۵% درصد وزن خشک بود. تمام ساقه ها توسط هورمون IAA ریشه دار شدند ( ۱۹۹۸Bohlmannm, J.). آزمایشات دیگری برای القای ساقه با ترکیبات مختلف هورمونی BAP و NAA صورت گرفت. در ترکیب mgl-1 NAA 05/0 و mgl-1 BAP 2 دو نژاد مورد آزمایش ژنوتیپ های ۰۲۵ و ۰۰۱ بالاترین میزان فراوانی ساقه دهی را داشتند بر اساس این نتایج محیط استاندارد محیط MS پایه حاوی mgl-1 NAA 05/0 و mgl-1 BAP 2 به عنوان محیط منتخب جهت القای ساقه بعد از تراریختی معرفی شد (۱۹۹۸Bohlmannm, J.).
(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))
آزمایشات دیگر نشان داده اند که فراوانی القای ساقه در ژنوتیپ Nj با هورمون هایmgl-1 NAA 05/0 و BAP 5/0 بالاترین مقدار بود و فراوانی القای ساقه در ژنوتیپ ۰۰۱ با ترکیب NAAmgl-1 ۰۵/۰ وmgl-1 BAP 1/0 بالاترین مقدار بود. نکته مهم در القای ساقه این بود که در این روش ساقه ها به طور مستقیم از محل زخم و بدون واسطه کالوس به وجود آمدند ولی در روش های قبلی ابتدا کالوس دهی رخ داده سپس تبدیل به ساقه می گردد. این روش القای ساقه با روش های قبلی متفاوت بود. اولاٌ اینکه در روش های قبلی یک برگ به قسمتهای متعددی تقسیم می شد، در حالی که در این روش تمام برگ به طور کامل درون محیط القایی ساقه قرار می گیرد. برای ژنوتیپ ۰۰۱ سلولها در محل زخم دمبرگ مستعد رشد ساقه اند. در حالی که سلول های سایر بخشهای برگ مستعد تولید کالوس می باشند. ثانیاٌ سن گیاهان ۰۰۱ استفاده شده حدود ۱۵ روز پیرتر از روش قبلی بود. به نظر می رسد برگهای جوان برای القای ساقه در ژنوتیپ ۰۰۱ مناسب نبودند. برای A.annua القای ریشه نسبت به القای ساقه آسان تر است. یک هفته پس از انتقال ساقه ها به محیط القای ریشه، ریشه دهی صورت می گیرد. نتایج نشان داده است که القای ریشه حتی در محیط بدون هورمون و MS پایه رخ می دهد. با این حال محیط های حاوی mgl-1 NAA 05/0 برای القای ریشه پیشنهاد شده و در غلظت های بالاتر امکان ایجاد کالوس دهی وجود دارد (۱۹۹۸Bohlmannm, J.).
جدول ۳-۱- مطالعات کشت بافت A.annua
منبع | ترکیب هورمونی محیط پایه MS (میلی گرم در لیتر) | نتیجه | ریز گیاه | منبع گیاهی |
Nair و همکاران، ۱۹۸۶ | ۰/۵-۲ NAA/IBA , 0/5 NAA , ۰/۲ BAP |
کالوس ساقه،ریشه | ساقه | وحشی |
Tawfiqو همکاران، ۱۹۸۹ | ۲,۴-D , 0/1 KINETIN 1 | کالوس | کالوس | - |
Kimو همکاران، ۱۹۹۲ | ۰/۵ pcPA , 5 BAP | کالوس-گال | ریشه | تراریخت با A.rhizogenes |
Basile و همکاران، ۱۹۹۳ | ۰/۱-۰/۲۵ BA , 0/5 2,4-D , 0/5-2 NAA | کالوس | برگ | - |
Woerdenbag، ۱۹۹۳ | ۰/۰۵ NAA- 0/2 BAP | ساقه |