- مبانی‌ اعتقادی‌، فرهنگی‌ و ملّی‌ کشور
- بیان‌ احساسات‌، عواطف‌ و افکار در قالب‌ گفتار و نوشتار
- جنبه‌های‌ زیبایی‌ سخن‌ و تحسین‌ آن‌
- مطالعه‌
۲- تلطیف‌ احساسات‌ و عواطف‌
ج‌- حیطه‌ی‌ مهارتی‌:
۱- گوش‌ دادن‌
- دقّت‌ و تمرکز در سخن‌ گوینده‌
- درک‌ سخن‌ و دریافت‌ پیام‌
- دریافت‌ ارتباط‌ بین‌ بخش‌های‌ مختلف‌ پیام‌
- بررسی‌ و اظهارنظر درباره‌ی‌ شنیده‌ها
۲- سخن‌ گفتن‌
- به‌کارگیری‌ اندیشه‌ قبل‌ از سخن‌ گفتن‌
- به‌کارگیری‌ زبان‌ مناسب‌ برای‌ مخاطبان‌

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

- توانایی‌ سخن‌ گفتن‌ در برابر جمع‌
- به‌کارگیری‌ کارافزارهای‌ مناسب‌ ارتباطی‌
- انسجام‌ در رساندن‌ پیام‌
- توانایی‌ شرکت‌ در بحث‌ و گفت‌وگوها
۳- ‌ خواندن‌
- تمرکز و دقّت‌ در نوشته‌
- توانایی‌ بلندخوانی‌ و صامت‌خوانی‌
- خواندن‌ با لحن‌ و آهنگ‌ مناسب‌
- درک‌ نوشته‌ها و دریافت‌ پیام‌ اصلی‌ آن‌ها
- دریافت‌ ارتباط‌ بین‌ بخش‌های‌ مختلف‌ نوشته‌
- به‌کارگیری‌ کارافزارهای‌ مناسب‌ در خواندن‌
- گسترش‌ دایره‌ی‌ دید در خواندن‌
- کسب‌ عادات‌ مطلوب‌ در خواندن‌
۴- ‌ نوشتن‌
- توانایی‌ به‌کارگیری‌ به‌هنجار خط‌
- نوشتن‌ درست‌ کلمات‌ و جملات‌ شنیده‌شده‌ (املا )
- به‌کارگیری‌ علایم‌ نشانهگذاری در نوشتن‌
- توانایی‌ در نگارش‌ برخی‌ از پاره‌مهارت‌های‌ نگارشی‌ (انشا )
۲-۱۹٫ فلسفهی وجودی، ماهیت و ساختار ماده ی درسی
زبان فارسی نماد و نماینده ی هویّت ملّی و فرهنگی ماست و ادبیّات فارسی آیینه ی فرهنگ و اندیشه ی ایران اسلامی از گذشته تاکنون ، در نتیجه آموزش ادبیّات و زبان فارسی پُل پیوند با هویّت و فرهنگ اسلامی - ایرانی است . جز این ، همه ی دروس نیازمند زبان و ادبیّات فارسی هستند و آموزش ، بدون این واحدهای درسی امکان پذیر نیست . محتوای ادبیّات فارسی نیز به تربیت معنوی ، تلطیف روح و احساسات و انتقال فضایل الهی و انسانی کمک می کند .
در ساختار این ماده ی درسی دو قلمرو زبان و ادبیّات در عین پیوستگی جدا ومجزا از هم مطرح شده اند . کارکرد زبان ، ایجاد پیوند و رساندن پیام است در نتیجه قبل از هر چیز یک پدیده ی اجتماعی است که در هیئتی سامان مند ، پویا و زنده رسالت انتقال مفاهیم را به عهده دارد . به دیگر زبان می توان گفت زبان هر قوم روح آنان و روح آنان زبانشان است . ادبیّات نیز نوعی زبان است امّا زبان برتر که به انتقال هنرمندانهی اندیشه و فرهنگ می پردازد در تحلیلی کوتاه می توان گفت رسالت زبان «چه گفتن» و ادبیّات «چگونه گفتن» است.
در زبان اصل بر پیام رسانی است پس تلاش بر سادگی ، رسایی و کوتاهی واژگان است امّا در ادبیّات ، احساس و عاطفه ، خیال و موسیقی و در یک کلام زیبا گفتن هدف است.
همین است که زبان و ادبیّات پیوندی ناگسستنی دارند . زبان ، ابزاری است در خدمت ادبیّات و ادبیّات ، جریانی است در خدمت زبان و بارور کننده ی آن . پویایی زبان ، زایش واژگان و ترکیب های نو ، ره آورد ذهن خلاق و خیال پرداز ادیبان است . با این توضیحات دو مقوله ی زبان و ادبیّات از نظرگاه منطق آموزشی یکسان نیستند زبان را با نگرشی منطقی ، علمی و خردباورانه باید بررسی و تدریس کرد و ادبیّات را با نگرشی هنری و ذوقی . در درس زبان تعلیم صورت میگیرد ولی ادبیّات بر انگیزش و تلطیف عواطف و پالایش درون استوار است .
در ساختار دروس کتاب درسی ، ادبیّات در هیئت متن های درسی زیبا و رسا ، اشعار ، حکایات و داستان هایی از متون کلاسیک و نو- ایران و جهان- سامان پذیرفته است . مقوله های زبانی نیز در قالب آموزه های دستوری ، نگارشی و املا ، تدوین یافته اند.

۲-۲۰٫ اهداف‌ کلی‌ برنامه‌ی‌ درس ‌ فارسی‌ پایه‌های چهارم‌، پنجم‌ و ششم ابتدایی‌

الف‌- حیطه‌ی‌ شناختی‌:
- گسترش‌ و تعمیق‌ حوزه‌ی‌ نشانه ها و معانی‌ مناسب‌ ‌
- توسعه‌ و تعمیق‌ آشنایی‌ با ساختار زبان‌ فارسی‌ معیار
- آشنایی‌ با ساختار نظم‌ و نثر و نمونه های آن
- ژرفابخشی و گسترش آشنایی‌ با مسائل‌ اعتقادی‌، ملّی‌، فرهنگی- تربیتی ، هنری‌، اجتماعی‌، علمی‌
- آشنایی‌ مختصر با جلوه‌های‌ هنری‌ زبان‌
- آشنایی‌ با شیوه‌های‌ خواندن‌ و نوشتن‌
- آشنایی‌ با انواع‌ پاره‌ مهارت‌های‌ نگارشی
‌ ب‌- حیطه‌ی‌ عاطفی‌:
- پرورش‌ و تقویت‌ علاقه‌ و نگرش‌ مثبت‌ نسبت‌ به‌:

هر گاه ملکی بر خلاف قانون به ثبت رسیده باشد یا در تعارض اسناد ذینفع می تواند به دادگاه حقوقی صلاحیتدار دادخواست بدهد و ابطال ثبت و سند مالکیت رااز دادگاه بخواهد.
همچنین هر گاه در عملیات ثبتی اشتباهی رخ دهد و هیات نظارت اصلاح آن را مخل حقوق دیگران بداند ذینفع می تواند از دادگاه حکم ابطال را بخواهد.
۱-۲-۵ چگونگی ابطال سند مالکیت
گفتیم که منظور از دعاوی مربوط به ثبت اسناد دعاویی است که بعد از ثبت ملک در دفتر املاک و صدور سند مالکیت حادث می گردد این دعاوی را در دو بخش دعاوی در صلاحیت مراجع قضایی و دعاوی در صلاحیت مراجع غیر قضایی بیان خواهیم نمود.
۱-۲-۵-۱ شرایط پذیرش دعوی ابطال سند مالکیت
بر اساس ماده ۲۴ قانون ثبت پس از انقضای مدت اعتراض دعوی اینکه در ضمن جریان ثبت حقی از کسی ضایع شده پذیرفته نخواهد شد و بر اساس ماده ۲۲ همان قانون نیز همین که ملکی مطابق قانون در دفتر املاک به ثبت رسید دولت فقط کسی را که ملک به اسم او ثبت شده و یا کسی که ملک مزبور به او منتقل گردیده و این انتقال نیز در دفتر املاک به ثبت رسیده یا اینکه ملک مزبور از مالک رسمی ارثاً به او رسیده باشد مالک خواهد شناخت. با این اوصاف و با صراحت مواد ۲۲ و ۲۴ قانون ثبت آیا دعوی ابطال سند مالکیت قابل پذیرش می باشد؟ در اینجا دو نظر ابراز شده است:
عده ای معتقدند که، چنانچه ملکی بر خلاف قانون به ثبت رسیده باشد ذی نفع ابطال سند مالکیت را از دادگاه بخواهد و این موضوع مغایرتی با ماده ۲۲ قانون ثبت نیز ندارد چرا که ماده ۲۲ قانون ثبت ناظر به ملکی است که مطابق قانون به ثبت رسیده و چنانچه در جریان ثبت ملک رعایت مقررات قانونی نشده باشد و با این وصف ملک به ثبت رسیده باشد. منصرف از ماده ۲۲ قانون ثبت می باشد.
عده ای دیگر معتقدند که: برابر مواد ۲۲ و ۲۴ قانون ثبت ابطال سند مالیت و دعوی مربوط به آن قابل استماع نیست و سند مالکیت قابل ابطال نمی باشد، چرا که قانون ثبت تشریفات خاصی برای ثبت ملک و صدور سند مالکیت قائل شده است و انتظام امور جامعه و حقوق افراد نیز ایجاب می کند که مالکیت متزلزل نشود در غیر اینصورت با هیچ اطمینانی نمی توان معامله ای انجام داد^[۱۳]. به نظر می رسد که عدل و انصاف اقتضاء این را دارد که اگر جریان عملیات ثبتی صحیحاً صورت نگرفته باشد مثلاً در مواردی که انتشار آگهی نوبتی لازم است، آگهی منتشر نشده باشد چون چنین ثبتی مطابقت قانون صورت نگرفته و با عدم انتشار آگهی حق اعتراض کسانی که میتوانسته ند بر آن اعتراض کنند ضایع شده است مدعی یا مدعیان حق می توانند در دادگاه اقامه دعوی نموده و احقاق حق کنند^[۱۴].

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

البته نظر گروه اول خالی از قوت نیست و به نظر می رسد که به هر حال در پذیرش دعوی ابطال سند مالکیت را باید محدود به موارد خاص و مواردی که به هر حال چاره ای جز پذیرفتن دعوائی وجود ندارد نموده و از پذیرش دعوی در تمامی موارد خودداری نمود.
بهر تقدیر از نجائیکه رویه قضائی طرح دعوی ابطال سند مالکیت را به شرحی که اشاره شد پذیرفته است، بنابراین خواهان ابطال سند مالکیت در صورتی که بتواند ثابت کند که مقررات قانونی در جریان ثبت ملک رعایت نشده است می تواند طرح دعوی نماید.
دعوی ابطال سند مالکیت باید به موجب دادخواست مطرح و لزوماً مقررات ماده ۵۱ قانون آئین دادرسی مدنی نیز باید رعایت گردد و از نظر مالی بودن یا غیر مالی بودن هم دعوی ابطال سند مالکیت یک دعوی مالی محسوب می گردد مرجع صالح نیز دادگاه عمومی محل وقوع ملک می باشد.
۱-۲-۵-۲ نحوه ابطال
ابطال سند رسمی در صلاحیت دو مرجع قضایی و غیر قضایی می باشد که مراجع غیر قضایی عبارتند از: ادارات مربوطه مانند منابع طبیعی یا جنگل داری که ما به تشریح هر یک خواهیم پرداخت.
۱-۲-۵-۲-۱ در محکمه
هر گاه ملکی بر خلاف قانون به ثبت رسیده باشد یا مشکل قانونی وجود داشته باشد ذی نفع می تواند به دادگاه محل وقوع ملک دادخواست ابطال سند رسمی را بدهد.
۱-۲-۵-۲-۲ در ادارات ثبت
ابطال اسناد مالکیت که در صلاحیت اداره ثبت است چندین مورد می باشد که توضیح مفصل و تشریح هر کدام از این موارد در جای خود داده خواهد شد منظور از این بحث مواردی از ابطال سند مالکیت است که نیاز به صدور حکم از دادگاه نداشته و اداره ثبت طبق دستور هیات نظارت یا به حکم قانون، راساٌ نسبت به ابطال سند مالکیت اقدام می نماید.
۱-۲-۵-۲-۳ به حکم قانون
ممکن است سند مالکیت صادر شود اما قانون راساً اعلان بطلان آن را بکند در اینجا نیز چندین مورد وجود دارد که در جای خود به توضیح بیشتر آنها خواهیم پرداخت.
در این مورد قانونگذار ابطال اسناد را به مراجع و ادارات مربوطه به خود واگذار نموده و این ادارات و مراجع راساً می توانند نسبت به ابطال سند صادره اقدام نمایند البته این مستلزم ین است که این اسناد مخالف با قانون تشخیص داده شوند مانند اداره جنگلبانی یا منابع طبیعی
۱-۲-۵-۳ طریقه اجرای حکم ابطال
مالکیت صادره از طرف ادارات ثبت همیشه معتبر هستند و فقط با حکم قطعی مراجع قضا ئی صالحه یا قانون مصوب مجلس شورای اسلامی که به تائید شورای نگهبان هم رسیده باشد و یا در صورت انتقال ملک وسیله انتقال به دیگری قابل ابطال می باشند
روش ابطال اسناد مالکیت قبلی و صدور سند مالکیت جدید در اجرای قانون زمین شهری و احکام دادگاهها و اسناد انتقال اجرائی
وصول نامه از مرجع مربوطه به ضمیمه مدارک قطعی قابل قبول
دستور ثبت نامه در دفتر اندیکاتور و ارسال به بایگانی جهت ضمیمه نمودن پرونده
ضمیمه نمودن پرونده به تقاضا و ارسال آن به دفتر املاک جهت اقدام بعدی
قید مراتب ابطال در پیش نویس سند مالکیت اولیه و ثبت دفتر املاک و تهیه پیش نویس سند مالکیت جدید بوسیله متصدی دفتر املاک
امضاء مراتب قیدشده و نیز پیش نویس سند مالکیت توسط مسئولان اداره
گواهی دفتربازداشتی
تهیه بخشنامه لازم مبنی بر اعلام ابطال سند مالکیت اولیه به دفاتر اسناد رسمی تابعه توسط دفتر املاک
امضاء بخشنامه فوق بوسیله مسئول مربوطه
صدور بخشنامه از دفتر اندیکاتور و ارسال آن به دفاتر اسناد رسمی
ارسال پرونده به حسابداری جهت پرداخت بهاء دفترچه سند مالکیت و پرداخت بهاء آن توسط متقاضی
ارسال پرونده به دفتر املاک جهت تحریر سند مالکیت
تحریر سند مالکیت بوسیله متصدی دفتر املاک
امضاء ثبت دفتر املاک و سند مالکیت توسط مسئول مربوطه
ارسال پرونده به بایگانی جهت ثبت در دفتر تسلیم اسناد و پلمب و تحویل آن به ذینفع در قبال اخذ رسید
تذکر : در صورتیکه صدور سند مالکیت مستند به سند انتقال اجرائی باشد علاوه بر تقاضای ذینفع ارائه صورت جلسه تحویل ملک یا اقرار به تحویل ضروری است. هرگاه فردیکه سند مالکیت بنام او صادر گردیده فوت نماید وارث او می‌توانند با ارائه مدارک زیر از اداره ثبت محل وقوع ملک درخواست صدور سند مالکیت نماید :
الف - تقاضای صدور سند مالکیت
ب – فرم گواهی حصر وراثت
ج - فرم ۱۹ مالیاتی
د - اصل سند مالکیت مورث^[۱۵]
بخش دوم : موارد ابطال اسناد مالکیت به حکم دادگاه
۲-۱ ابطال سند مالکیت در دادگاه
اسناد مالکیت صادره از طرف ادارات ثبت همیشه معتبر هستند و فقط با حکم قطعی مراجع قضائی صالحه یا قانون مصوب مجلس شورای اسلامی که به تائید شورای نگهبان هم رسیده باشد و یا در صورت انتقال ملک بوسیله انتقا به دیگری قابل ابطال می باشند که بعد از وصول نامه درخواست ابطال سند از مرجع صلاحیتدار به همراه مدارک قطعی قابل قبول مراحل ابطال سند انجام می شود. اسنادی که به حکم مراجع قضایی قابل ابطال می باشد چندین مورد می باشند.
که ما در توضیح هر یک و تشریح آن خواهیم پرداخت.
۲-۱-۱ ابطال اسنادی که بر خلاف قانون به ثبت رسیده(عملیات مقدماتی)
هر گالاه ملکی بر خلاف قانون به ثبت رسیده باشد ذینفع میتواند به دادگاه حقوقی صلاحیتدار دادخواست بدهد و ابطال سند و ثبت را از دادگاه بخواهد. دراین صورت دادگاه پس از رسیدگی و احراز صحت دعوی حکم بر ابطال ثبت و سند مالکیت می دهد. برای ثبت ملک لازم است عملیات مقدماتی آن صورت بگیرد، عملیات مقدماتی ثبت، همه کارهایی است که پس از پایان یافتن و ختم آنها اداره ثبت، آمادگی صدور سند مالکیت را دارد این کارها با نشر گهی ماده ۹ قانون ثبت آغاز و پایان یافتن کارهای تحدید حدود پایان می پذیرد.
در اینجا دو نکته قابل ذکر است:

1. 1. دعوی مطروحه از جمله دعاوی مالی است که باید تقویم و تمبر باطل شود.

1. 1. خوانده دعوی فقط دارنده سند مالکیت مورد تقاضای ابطال خواهد بود.

• قانون مدیریت خدمات کشوری، آئین نامه اجرایی ماده ۲۲، آئین نامه اجرایی ماده ۲۴ .

• قانون مدیریت خدمات کشوری، ماده ۱۳، ماده ۱۸، ماده ۲۲، ماده ۲۴ .

• قهرمانی، محمد. حسن مرادی، نرگس. (۱۳۸۶). تدوین الگوی برون سپاری آموزش سازمانی. مجله پیام مدیریت. شماره ۲۵٫

• ماهنامه بین المللی عمران،معماری و شهرسازی. (۱۳۹۲). سال ۱۴٫ شماره ۱۲۵٫

• محمدی، محمد. (۱۳۸۸). فعالیت های قابل واگذاری دولتی به بخش تعاون استان خراسان جنوبی با توجه به تمایل و توان این بخش. مجله تعاون. شماره ۲۱۲٫

• مختاری، محمدعلی. (۱۳۹۲). برون سپاری. مجله علوم اجتماعی. شماره ۶۵٫

• مدهوشی، مهرداد. کوهکن مؤخر، امیر. (۱۳۹۱). تبیین نقش استراتژی برون سپاری بر بهره وری سازمان. پژوهشنامه مدیریت اجرایی. شماره ۷٫

• معتدل، محمدرضا. افشار کاظمی، محمدعلی. دست باز، سارا. (۱۳۹۰). ارائه مدلی جهت پشتیبانی تصمیمات برون سپاری پروژه های فناوری اطلاعات با بهره گرفتن از متد تصمیم گیری گروهی. مجله پژوهش های مدیریت. شماره ۸۹ .

• مهرگان، محمدرضا. سلامی، هادی. خواجه، مصطفی. (۱۳۹۰). ارائه یک مدل تصمیم گیری چند شاخصه جهت برون سپاری فرایندهای کسب و کار با بهره گرفتن از تکنیک فرایند تحلیل شبکه ای. مجله مدیریت توسعه و تحول. شماره ۶٫

• نشریه داخلی معاونت طرح و برنامه دانشگاه فردوسی مشهد. (۱۳۸۹). شماره ۳۸٫

• نهاوندی، نسیم. یوسفیان، محمدحسین. بیات، علی. (۱۳۸۷). تعیین راهبرد برون سپاری فناوری اطلاعات در بانک های ایران. فصلنامه اقتصاد و تجارت نوین. شماره ۱۳٫

• هندی، چارلز. (۱۳۸۰). اینجا جای ما نیست،عصر تضاد و تناقض. ترجمه محمود طلوع، تهران: انتشارات موسسه فرهنگی رسا.

ب) منابع انگلیسی

• Baloh, Peter & Jha, S & Awazu, Y. (2008). Building Strategic Partnerships for Managing Innovation Outsourcing. International Journal of Strategic Outsourcing. Vol.1. No.2. 100-121.

• Belcourt, M. (2006). Outsourcing – The Benefits & The Risks. Human Resource Management Review, 16, 269-279.

• Bertrand, Q & Francois D. (2003). Bringing Together Strategic Outsourcing & Corporate Strategy: Outsoucing Motives & Risks. European Management Journal. Vol21. No5. 647-661.

• Carig, Robert. (1996). The ASTD Training & Development. Handbook. USA: Published by ASTD.

• Chase, R,B. Jacobs, F,R. & Aquilano, N,J. Operations Management For Competitive Advantage. 10 ed. Boston: Irwin/McGraw-Hill. (2004).

• Field, T. (2001a). Homegrown talent,CIO Magazine.

• Field, T. (2001b). Outsourced in America, CIO Magazine.

• Greaver II, M,F. (1999). Strategic Outsourcing: A Structured Approach to Outsourcing Decision & Initiatives. New York: AMACOM.

• Hale, Judith A. (2006). Outsourcing Training & Development,Factors for Success, John Wiley & Sons Inc. , Published by Pfeiffer an Imprint of Wiley.

• Johnson, G.& Scholes, K. (1999). Exploring Corporate Strategy, tex & case,5. Prentice-Hall.

• Klepper, R. & Jones, W. (2004). Outsourcing Information Technology Systems & Services,Retrieved from: http://www.businessforum.com/Woj01.html<

• Lankford, W,M. & Parsa, F. Outsourcing: A Primer. Management Decision37, (1999): 310-316.

• Mengen, Markus. (2001). Information Systems Outsourcing & ASP In The Health Care Industry. Bayreuth Hospital University. Retrieved13 Aug. 2003.

• Momme, Jesper. & Hams, Henrik. (2002). An Outsourcing Framework: Action research in the Heavy industry sector, Europian journal of purchasing & supply management9.

• Rothery, Brarin. & Ian Robertson. (1995). The Truth About Outsourcing Hampshire,England:Gower Pubjlishing Company.

• Venkatraman, N, V. (2004). Off Shoring Without Guilt. Journal of MIT Sloan Management Review. Vol45. NO3. 14-16.

پیوست­ها
­
پیوست شماره ۱)
پرسشنامه
به نام خدا
بررسی قابلیت واگذاری و نحوه واگذاری فعالیت های دانشگاه کاشان
پرسشنامه حاضر در راستای شناسایی فعالیت های قابل واگذاری و نحوه واگذاری آن به بخش غیر دولتی در دانشگاه کاشان می باشد، از این رو خواهشمند است با توجه به تجارب گرانبها و ارزشمند حضرتعالی در این زمینه، نظر خویش را در رابطه با سوالات زیر مبذول فرمائید.
سن: جنسیت: وضعیت تاهل: وضعیت شغلی: میزان تحصیلات: وضعیت استخدامی: سابقه خدمت:
بخش اول: بررسی قابلیت واگذاری فعالیت ها بر اساس معیارهای واگذاری
سئوال ۱: در جدول زیر، به هر فعالیت نسبت به معیار واگذاری نمره ای از ۱ تا ۵ (۵= خیلی زیاد، ۴= زیاد، ۳= متوسط، ۲= کم، ۱= خیلی کم) اختصاص دهید.

فعالیت ها
معیارهای واگذاری

در کبد ماهیان صید شده از ایستگاه­های مختلف رودخانه زاینده­رود است. نمونه­برداری از چهار ایستگاه چشمه­دیمه و خرسونک (در بالادست رودخانه به عنوان ایستگا­ه­های پاک) و چمگردان و پل صفائیه (در پایین­دست رودخانه به عنوان ایستگاه آلوده) صورت گرفت. در این مطالعه در مجموع ۳۲۳ قطعه ماهی صید شد. میانگین وزنی و طولی ماهیان به ترتیب معادل ۹۳/۱۴ گرم و ۹۶ میلی­متر بود. در مقایسه فراسنجه­های خونی، تعداد کل گلبول­های قرمز، میزان هموگلوبین و هماتوکریت و تعداد کل گلبول­های سفید تفاوت معنی­داری را بین ماهیان ایستگاه­های مختلف نشان نداد. با این وجود در شمارش افتراقی گلبول­های سفید، درصد انواع گلبول­های سفید به جز لنفوسیت­ها در ماهیان ایستگاه چمگردان نسبت به ماهیان سایر ایستگاه­ها بالاتر بود (۰۵/۰p<). شاخص­ های ثانویه خون­شناسی نظیر حجم متوسط گویچه قرمز، میانگین غلظت هموگلوبین ذره­ای و میانگین هموگلوبین ذره­ای در ایستگاه­ چمگردان کم­تر از مقادیر متناظر در سایر ایستگاه­ها بود (۰۵/۰p<). در مطالعه نسبت جنسی ماهیان مشخص گردید که در تمامی ایستگاه­ها به جز ایستگاه پل صفائیه انحراف معنی­داری از نسبت مورد اننظار (۱:۱) (با فراوانی بیش­تر جنس ماده) وجود دارد (آزمون مربع کای؛ ۰۵/۰p<). با این وجود در مطالعه میکروسکوپی گنادها، نشانی از بروز ناهنجاری­های گنادی نظیر جنسیت بینابینی مشاهده نشد. شاخص توسعه گنادی (GSI) در ماهیان نر و ماده محاسبه شد. مقایسه آماری این شاخص تنها کاهش معنی­دار آن را در جنس نر ماهیان ایستگاه چمگردان با ماهیان سایر ایستگاه­ها نشان داد (۰۵/۰p<). بیان ژن ویتلوژنین در کبد عروس­ماهی زاینده­رود به عنوان شاخص زیستی معتبری برای وجود آلاینده­های مخرب سیستم اندوکراینی با فعالیت شبه­استروژنی در منابع آبی مدنظر قرار گرفت. به این منظور ابتدا نسبت به توالی­یابی کامل ژن ویتلوژنین در عروس­ماهی زاینده­رود اقدام شد. نتایج نشان داد که ژن کدکننده ویتلوژنین در این گونه دارای ۴۱۷۷ جفت­باز است که پروتئینی حاوی ۱۷۷۶ آمینواسید را تولید می­ کند. بررسی شدت بیان ژن ویتلوژنین در جنس نر و ماده عروس­ماهی زاینده­رود در ایستگاه­های مختلف به روش Real-time PCR و با بهره گرفتن از ژن کنترل داخلی بتا-اکتین نشان­دهنده وجود بیان نسبی در هر دو جنس در تمامی ایستگاه­های مورد بررسی است. شدت بیان در ایستگاه­های مختلف تفاوت معنی­داری را نشان داد به­ طوری­که میزان بیان نسبی ویتلوژنین در ماهیان چمگردان در هر دو جنس به­ طور معنی­داری نسبت به سایر ایستگاه­ها بالاتر بود (۰۵/۰p<). به­ طور کلی نتایج این تحقیق بیان­گر اثرات احتمالی ترکیبات مخرب سیستم اندوکراینی با خاصیت شبه­استروژنی بر برخی ویژگی­های زیستی عروس­ماهی زاینده­رود نظیر انحراف از نسبت جنسی (فراوانی بیش­تر جنس ماده) و بیان ژن ویتلوژنین در جنس نر و تغییر بیان آن در ماهیان ایستگاه­های مختلف رودخانه زاینده­رود بود.

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

واژگان کلیدی: ترکیبات مخرب سیستم درون ریز، عروس­ماهی زاینده­رود Petroleuciscus esfahani، خون­شناسی، بافت­شناسی گناد، بیان ویتلوژنین.
فصل اول
مقدمه
طی دو دهه اخیر، موضوع حفاظت از محیط زیست در مقابل آلاینده­های طبیعی یا مصنوعی حاصل از فعالیت­های انسان، توجه و نگرانی­های زیادی را با خود به همراه داشته است [۱۸]. این نگرانی­ها موجب ایجاد علاقه در بسیاری از دولت­ها، سازمان­های بین ­المللی، جوامع علمی، صنایع شیمیایی و عموم مردم برای تشکیل برنامه­ ها، کنفراس­ها و کارگاه­های تحقیقاتی در مورد موضوعات مربوط به ترکیبات مخرب سیستم درون­ریز (EDCها­)^[۱] گردیده است. ترکیبات مخرب سیستم درون­ریز ماده یا ترکیبی از مواد هستند که عملکرد (های) سیستم درون­ریز را تغییر می­ دهند و در نتیجه موجب اثرات متعدد بر سلامت یک جاندار سالم، دودمان و یا (زیر) جمعیتی از آن می­شوند [۳۲]. به عبارت دیگر هر ترکیبی که در تولید، ترشح، انتقال، اتصال، عملکرد و یا حذف هورمون­های طبیعی بدن مداخله کند و باعث تغییر وظایف طبیعی آن­ها همچون نمو، رفتار، باروری، بقا و همئوستازی شود را ترکیب مخرب سیستم درون­ریز می­نامند. این ترکیبات می­توانند باعث ایجاد تومورهای سرطانی، نقایص مادرزادی و سایر ناهنجاری­های توسعه­ای شوند. از جمله این ناهنجاری­ها می­توان به ناتوانی در یادگیری، مشکلات حاد در توجه و شناخت، توسعه مغزی، بدشکلی در بدن، توسعه اندام­های تولیدمثلی، ماده­سازی در جنس نر یا اثرات مردانه بر جنس ماده اشاره کرد [۲۳].
EDCها ممکن است به صورت طبیعی و یا در اثر فعالیت­های انسانی تولید شوند و شامل گروه ­های مختلفی از مواد شیمیایی از قبیل هورمون­های طبیعی و ساختگی، اجزاء گیاهی، آفت­کش­ها، ترکیبات مورد استفاده در صنعت پلاستیک سازی و محصولات مربوط به بهداشت فردی و سایر محصولات و آلاینده­های جانبی حاصل از صنایع هستند. برخی از
این ترکیبات چربی­­دوست و بنابراین پایا هستند و می­توانند مسافت­های طولانی بین مرزهای طبیعی جابجا شوند اما برخی دیگر آب­دوست هستند و به سرعت در محیط یا در بدن انسان تجزیه می­شوند و ممکن است تنها در دوره­ای کوتاه اما بحرانی از توسعه سیستم­های بدنی حضور داشته باشند [۲۶].
تنوع بسیار زیاد ویژگی­های فیزیکوشیمیایی EDC­ها به این معنی است که ممکن است این ترکیبات تجزیه شوند و اثرات آن­ها به ­اشکال مختلف بروز نماید. به علاوه، گستره­ پراکنش این ترکیبات در محیط بسیار وسیع است و شامل هوا، آب، خاک، رسوبات، غذا و محصولات مصرفی می­ شود. جذب EDC­ها از طریق غذا، اصلی­ترین مسیر در معرض قرارگیری انسان و بیش­تر جانوران است که می ­تواند به تجمع و بزرگ­نمایی زیستی^[۲] منجر شود [۲۶، ۵۲].
از آنجایی­که مقصد نهایی بیش­تر آلاینده­ها، محیط­های آبی هستند، موجودات آبزی به ویژه ماهیان بیش­تر از سایر زیستمندان در معرض این ترکیبات قرار دارند. روزانه حجم زیادی از پساب­های شهری و صنعتی به رودخانه­ها و آب­های نزدیک سواحل دریاها می­ریزند. البته بسیاری از مواد شیمیایی نیز به­ طور تصادفی از زمین­های اطراف شسته و وارد این محیط­ها می­گردند [۹۹]. به علاوه بیش­تر EDC­ها به ندرت به ذرات موجود در آب متصل می­شوند و بنابراین به آسانی در دسترس آبزیان قرار می­گیرند [۵۵].
از میان EDCها، گروهی از هورمون­ها که به نظر می­رسد بیش­ترین قابلیت عملکرد به عنوان ترکیبات فعال درون­ریز را داشته باشند، استروئیدهای جنسی هستند و بیش­تر تحقیقات انجام شده در این رابطه بر ترکیبات استروژنی متمرکز بوده است. آنالیز شیمیایی آب و رسوبات به علت گران بودن و طیف گسترده این ترکیبات­، روش کارآمدی برای شناسایی آن­ها نیستند. بنابراین شاخص­ های زیستی حساس بسیاری به منظور پایش این ترکیبات ایجاد شده ­اند. یکی از مهم­ترین شاخص­ های ترکیبات استروژنی در محیط، القاء سنتز ویتلوژنین (VTG)^[3] در جنس نر یا افراد نابالغ است [۱۸]. از دیگر شاخص­ های زیستی مورد استفاده در تعیین اثرات EDC­ها می­توان به مطالعات رفتاری و فیزیولوژیک از قبیل بررسی بافت­شناسی و برخی از شاخص­ های گنادی درماهیان اشاره کرد [۴۹].
رودخانه زاینده­رود به عنوان بزرگ­ترین و مهم­ترین رودخانه مرکزی ایران از ارتفاعات زردکوه بختیاری سرچشمه می­گیرد و با ورود به استان اصفهان در جهت شرق جریان یافته و به تالاب گاوخونی واقع در جنوب شرقی استان منتهی می­ شود. در حدود ۶۵ درصد از واحدهای صنعتی بزرگ استان در حاشیه رودخانه زاینده­رود قرار گرفته­اند و علیرغم تلاش­ های به عمل آمده در جهت استقرار سیستم­های تصفیه پساب در این صنایع، فعالیت آن­ها توأم با آلودگی های زیست محیطی است [۵]. به علاوه با توجه به نحوه­ کاربری اراضی در حاشیه این رودخانه (زمین­های کشاورزی، واحدهای دامداری و دام­پروری، صنایع کوچک تا صنایع مادر از قبیل کارخانه­های فولاد و ذوب­آهن و همچنین حضور چندین کارخانه تصفیه فاضلاب) به نظر می­رسد این اکوسیستم در معرض انواع مختلف از ترکیبات مخرب سیستم درون­ریز قرار داشته باشد اما تاکنون هیچ مطالعه­ ای در رابطه با اثر این ترکیبات بر سلامت این اکوسیستم مهم آبی صورت نگرفته است.
اهداف این مطالعه:
تعیین حضور و اثرات ترکیبات مخرب سیستم درون­ریز در اکوسیستم رودخانه زاینده­رود با بهره گرفتن از بررسی سه ویژگی­ زیستی زیر در عروس­ماهی زاینده­رود Petroleuciscus esfahani:
۱- فراسنجه­های خونی
۲- شاخص توسعه گنادی (GSI)^[4]، بافت­شناسی گناد و نسبت جنسی
۳- بیان ویتلوژنین در کبد دو جنس نر و ماده
فصل دوم
کلیات و مرور منابع
۲-۱- کلیات
نگرانی از وجود آلاینده­ها در محیط زیست خصوصاً منابع آبی و اثرات مخرب آن­ها بر حیات وحش و انسان­ روز به روز در حال گسترش است. متاسفانه در اکثر مناطق جهان، حتی کشورهای توسعه یافته، گستره وسیعی از آلاینده­های زیست محیطی بدون حداقل بهبود و پایش وارد منابع آبی می­شوند. از جمله مهم­ترین انواع آلاینده­های زیست محیطی، ترکیبات مخرب سیستم درون­ریز است. این ترکیبات طیف وسیعی از مواد طبیعی و مصنوعی مورد مصرف در فعالیت­های مختلف انسانی اعم از صنایع مادر نظیر فولاد و کاغذسازی تا فعالیت­های مرسوم کشاورزی و دامپروری را در بر می­گیرند. بخش زیادی از این ترکیبات ناشی از فاضلاب­های شهری و خانگی است (جدول ۲-۱ و شکل ۲-۱).
مطالعات موجود در رابطه با انسان نشان می­دهد که حضور برخی از ترکیبات شیمیایی در محیط،کیفیت و کمیت اسپرم را کاهش و احتمال سقط جنین را افزایش می­دهد. در بسیاری از مناطق صنعتی جهان، تغییر نسبت جنسی از ۱:۱ به نفع یکی از دو جنس نر یا ماده،کاهش سن بلوغ جنسی، افزایش مقطعی در فراوانی ناهنجاری­های توسعه­ای مجرای تولیدمثلی مردان، افزایش مشاهده برخی سرطان­ها در بافت­­های هورمونی حساس از قبیل سینه، رحم، بیضه، پروستات و تیروئید را اغلب به عنوان شاهدی برای حضور گسترده EDC­ها و اثرات مختلف آن­ها بر سلامت انسان می­دانند [۲۶]. اما محدودیت­های بسیاری برای بررسی اثر این ترکیبات بر جوامع انسانی وجود دارد و بیش­تر مطالعات در این رابطه بر گونه­ های آبزی متمرکز بوده است.
جدول ۲-۱) معرفی برخی از ترکیبات مخرب سیستم درون­ریز به همراه برخی منابع تولیدکننده و اثرات احتمالی آن­ها بر زیستمندان [۵۴].

در ادامه مقدار ۱۰۰ میکرومتر از هر یک از این رقت­ها در پلیت­های استریل جداگانه با روش پورپلیت^[۵۵] در محیط SDA^[56] کشت داده شد (ظهوریان، ۱۳۸۹). نحوه­ انجام این روش بدین صورت است که مقدار ۱۰۰ میکرومتراز تمام رقت­ها بطور جداگانه در پلیت استریل ریخته شد و بلافاصله روی آن محیط SDA تازه که قبلاً با اتوکلاو استریل و در دمای اتاق تا حدودی خنک شده، اضافه گشت و درب پلیت­ها گذاشته شد و پلیت به شکل ∞ انگلیسی خوابیده روی سطح صاف میز کاری حرکت داده شد تا به مدت یک دقیقه کاملاً مخلوط گردد. با توجه به اینکه محیط SDA حاوی آگار نیز می­باشد، نبایستی بیش از حد داغ باشد زیرا در این صورت تمام میکرو­ارگانیسم­ها از بین رفته و رشدی مشاهده نخواهد شد. سپس پلیت­های حاوی محیط تا انعقاد کامل رها شد و نهایتاً در دمای ۲۷ درجه سانتی گراد به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت انکوبه گشت (ظهوریان، ۱۳۸۹) (شکل ۳-۴ و ۳-۵).
شکل ۳- ۴ کشت به روش پورپلیت
 
شکل ۳- ۵ اشکال متنوع مجموعه کلنی های رشد یافته در محیط SDA با روش کشت پورپلیت
پس از سپری شدن زمان مذکور و رشد کلنی­ها، آنها بر اساس اندازه، شکل حاشیه یا لبه­ی کلنی و تولید رنگیزه (پیگمان) مجدداً در پلیت جداگانه با روش کشت سطحی بر روی محیط SDA کشت داده شدند. در ادامه انکوباسیون در دمای cْ ۲۵ به مدت ۴۸-۲۴ ساعت صورت پذیرفت (ظهوریان، ۱۳۸۹؛ Black , 1999) (شکل ۳-۶).
 
شکل۳- ۶ روش کشت سطحی
۳-۳-۴ ایزوله نمودن کلنی ها در محیط کشت Mycosel Agar
برای ایزوله کردن تک کلنی­ها­ی مخمری از کلنی­های باکتریایی و قارچ­های ساپروفیت، کشت مجددی با همان روش روی محیط Mycosel Agar ( scc) انجام شد. برای تهیه­ این محیط کشت ۳۶ گرم از پودر آماده­ی محیط فوق را در یک لیتر آب دیونیزه حل وPH آن بررسی شد تا مقدار آن ۶٫۹ شود. سپس محلول جوشانده تا شفاف گشت و نهایتاً در دمای ۱۱۸ درجه ی سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو شد. سپس محیط کشت داخل پلیت­های استریل ریخته شد. پس از بسته شدن محیط­های کشت آنها را در دمای ۳۷ درجه به مدت ۲۴ ساعت انکوبه نموده و سپس آماده­ی کشت شدند. در ادامه کشت کلنی­ها به روش کشت سطحی صورت گرفت و در دمای c⁰ ۲۵ به مدت ۴۸-۲۴ ساعت انکوبه گردید (ظهوریان، ۱۳۸۹ ).

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

در نهایت برای اطمینان کامل از مخمر بودن کلنی­های ایزوله شده، از دو روش تشخیص میکروسکوپیک استفاده شد. بدین منظور روش رنگ آمیزی با معرف لاکتوفنول کاتن بلو انجام شد برای انجام این روش یک قطره از معرف مذکور وسط لام شیشه ای ریخته شد و یک کلنی از نمونه بر روی معرف افزوده شد و با آنس استریل مخلوط گشت و در نهایت با قرار دادن لامل روی آن، لام را داخل محفظه­ی مرطوب قرار داده و بررسی میکروسکوپی نمونه انجام گشت (دیبا،۱۳۹۰). در روش دوم لام رنگ­آمیزی گرم تهیه شد (ظهوریان، ۱۳۸۹؛ میرباقری و همکاران۱۳۹۰؛ Deak et al, 2000) و زیر میکروسکوپ شکل سلولی هر کلنی مشاهده شد (شکل ۳-۷).
شکل ۳- ۷ مشاهده میکروسکوپی نمونه­ها
۳-۴ شناسایی مخمرها در محیط­های کشت اختصاصی
بعد از ایزوله سازی به منظور شناسایی جنس مخمرها از دو محیط کشت CHA و CMA استفاده شد.
الف- تهیه محیط کشت CHA (کروم آگار کاندیدا)
طبق دستورالعمل شرکت سازنده ۴۷٫۷ گرم از پودر محیط کشت در یک لیتر آب دیونیزه حل شد و محلول حاصل روی شعله جوشانده و شفاف گردید. این محیط نیازی به اتوکلاو ندارد. بنابراین پس از شفاف شدن در دمای اتاق خنک شد و در پلیت استریل ریخته و پس از بسته شدن محیط­های کشت آنها را در دمای ۳۷ درجه به مدت ۲۴ ساعت انکوبه نموده و سپس آماده­ی کشت شدند.
کشت در محیط CHA با همان روش کشت سطحی انجام شد و پلیت­ها در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد انکوبه گردیدند؛ بررسی رنگ اختصاصی تولید شده در هر پلیت یک بار۲۴ ساعت پس از کشت اولیه و بار دوم ۴۸ ساعت پس از کشت اولیه صورت گرفت (Paritpoke et all, 2005) (شکل ۳-۸).
شکل ۳- ۸ تنوع رنگ های مشاهده شده بر روی محیط کروموژنیک
محیط کشت CMA ^[۵۷]
با توجه به اینکه محتویات این محیط شامل Corn Meal Extract (2 گرم در لیتر) و آگار (۱۵ گرم در لیتر) می­باشد بنابراین طبق دستورالعمل روی بطری محیط کشت، مقدار ۱۷ گرم از پودر محیط کشت در یک لیتر آب دیونیزه حل و روی شعله جوشانده و شفاف شد و در دمای ۱۲۱ درجه­ سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو گشت تا استریل شود. پس از بسته شدن محیط­های کشت آنها را در دمای ۳۷ درجه به مدت ۲۴ ساعت انکوبه نموده و سپس آماده­ی کشت شدند (Kelly&Funigiello, 1959 ).
کشت در محیط کشت CMA با روش Dalmau methodانجام شد، بدین صورت که در نوک آنس مقدار کمی از کلنی مخمر به صورت دو خط موازی نزدیک به هم داخل آگار تلقیح شد؛ عمق شیارها باید به قدری باشد که آگار پاره نشود، در نهایت لامل استریلی روی خطوط تلقیحی قرار داده شد. سپس در دمای ۲۸ تا ۳۰ درجه ی سانتی ­گراد به مدت ۴۸ تا ۷۲ ساعت انکوبه شدند (larone , 1939) (شکل ۳-۹ و شکل ۳-۱۰).
شکل ۳- ۹ نحوه ی کشت در محیط CMA
  
شکل ۳- ۱۰ تنوع سودوهایف های مشاهده شده بر روی محیط CMA
با توجه به اینکه ظاهر میکروسکوپی بسیاری از مخمرها بر روی محیط کشت CMAاختصاصی بوده و ممکن است آن دسته از مخمرهایی را که اختصاصات بیوشیمیایی مشابهی دارند را از هم تفکیک کنند بنابراین جنس­های مخمری با اطمینان از هم تفکیک شدند ( دیبا،۱۳۹۰). سپس با بهره گرفتن از روش­های مولکولار به طور دقیق­تر جنس و گونه­ و سویه­ی مخمرها شناسایی گردید.

کشت­کلنی­های مخمر در محیط کشت مایع غنی سازی مخمر
برای تکثیر مخمر از محیط کشت غنی سازی مخمر استفاده شد. این محیط کشت به صورت مایع بوده و برای تهیه ی ۹۰ میلی لیتر از آن، مواد به مقادیر زیر استفاده شد: آب دیونیزه شده ۹۰ میلی لیتر، گلوکز ۵ درصد ۵/۴ گرم، عصاره مخمر^[۵۸] ۸/۱ گرم، K2HPO4 9/0 گرم. برای تهیه­ این محیط ابتدا در یک ارلن به میزان ۹۵۰ میلی لیتر آب دوبار تقطیر (دیونیزه) اضافه گردید و مواد نامبرده بجز گلوکز به آن اضافه شد، PH بررسی گشت تا میزان آن برابر ۶ شود (با بهره گرفتن از استیک اسید یا NaOH به رنج ذکر شده رسید) سپس به مدت ۱۵ دقیقه در دمایc ْ ۱۲۱ در اتوکلاو قرار گرفت تا استریل شود، سپس ۴٫۵ گرم گلوکز را در ۵۰ میلی لیتر آب مقطر حل و با فیلتر در کنار شعله داخل محیط استریل اضافه شد و در داخل لوله­های آزمایش استریل ۲۰ میلی لیتر از محیط ریخته شد؛ سپس ۱گرم از مخمر به آن اضافه شده و به مدت ۴۸ ساعت در دمای c ° ۲۶در انکوباتور شیکر دار قرار گرفتند. (Aoki et al, 2002) (شکل ۳-۱۱).
شکل ۳- ۱۱ قرارگیری نمونه های مخمری تلقیحی به محیط کشت مایع غنی سازی مخمر داخل انکوباتور شیکردار
بعد از مدت گذرانده شده در دور ۳۵۰۰ rpm و مدت ۱۰ دقیقه سانتریفیوژ شدند و محلول رویی دور ریخته شد و روی رسوب باقی مانده سرم فیزیولوژی ریخته شد و این مراحل چندین مرتبه تکرار گشت تا رنگ محلول پس از سانتریفیوژ بی­رنگ شود. مخمر باقی مانده با سرم فیزیولوژی شستشو داده شده و تا زمان مصرف در دمای c⁰ ۲۰- نگهداری شد (Aoki et al, 2002) (شکل ۳-۱۲).